La prueba de sangre oculta en orina es un elemento esencial en las pruebas de orina. Los métodos de prueba comúnmente utilizados incluyen el analizador de orina, la reacción de sangre oculta y el examen microscópico de los glóbulos rojos en la orina (examen microscópico de los glóbulos rojos).
Debido a que la microscopía tiene un valor clínico importante para distinguir la hematuria glomerular y no glomerular, algunos estudiosos han propuesto que la microscopía es el "estándar de oro" para las pruebas de glóbulos rojos en la orina y no puede ser reemplazada por un analizador de orina. Sin embargo, en los últimos años, con la rápida popularización de los analizadores de orina, los parámetros de medición se han desarrollado en una dirección que es rápida, simple y precisa, lo que proporciona una mejor base de diagnóstico para el uso clínico, lo que requiere mucho tiempo y es laborioso, y para muchas personas; no están dispuestos a realizar un examen de sedimento de orina. Por tanto, en algunos hospitales la microscopía de orina tiende a ser sustituida paulatinamente por analizadores de orina. Con este fin, YSENMED analizó muestras de orina aleatorias de 400 pacientes ambulatorios utilizando dos métodos: reacción de sangre oculta del analizador de orina y examen de glóbulos rojos bajo un microscopio de orina, y comparó el grado de concordancia entre los dos métodos.
1. Principio
El analizador de orina utiliza el método del papel de prueba químico seco, que detecta ciertas sustancias químicas en la orina basándose en el cambio de color de cada módulo en la tira reactiva multienlace después de la reacción química con los componentes de la orina, como la detección directa de sangre roja. Las células y los glóbulos blancos del contenido citoplasmático infieren indirectamente la presencia o ausencia de células. El principio de la reacción de sangre oculta en el analizador de orina es: la actividad similar a la peroxidasa del hemo en la hemoglobina (Hb) puede descomponer el peróxido para liberar una nueva ecología [O], que oxida el sustrato o-toluidina en o-toluidina. cambia de amarillo → verde hierba → azul oscuro. La microscopía de orina utiliza la ampliación del microscopio para presentar directa e intuitivamente células y otros componentes tangibles bajo el microscopio, que es un fiel reflejo del sustrato.
2. Método
(1) El analizador de orina detecta sangre oculta en la orina. Sumerja la tira reactiva de orina en 10 ml de orina fresca mezclada durante 1 segundo, sáquela, colóquela en el instrumento para medir e imprima automáticamente los resultados.
(2) Microscopía: Tome 10 ml de orina en un tubo de ensayo, centrifugue a 1500 r/min durante 5 minutos, deseche el sobrenadante y deje 0,2 ml de sedimento. Después de mezclar bien, extraiga unos 20 μl en un portaobjetos de vidrio, agregue un cubreobjetos (2,0 cm × 2,0 cm) y luego use una luz más débil para observar la imagen completa con una lente de bajo aumento para evitar perder objetos pequeños pero significativos. y luego utilice un microscopio de alta potencia para identificar las células. Los resultados se expresan como: х/campo de alta potencia (HP).
Dado que los principios de los dos métodos de inspección son diferentes y los factores que los afectan también son diferentes, existen ciertas diferencias en los resultados de los dos métodos de inspección.
1. Falso positivo. Es decir, la reacción de sangre oculta del analizador de orina es positiva y el examen microscópico es negativo. Las razones más comunes son:
(1) Hemoglobina (Hb) La reacción de sangre oculta del analizador de orina puede tener una reacción positiva tanto con glóbulos rojos intactos como con Hb liberada por la disolución de los glóbulos rojos, mientras que un microscopio solo puede detectar glóbulos rojos no disueltos en la orina. El contenido de Hb en la orina de personas sanas es muy pequeño y cualitativamente negativo. Durante la enfermedad, hay dos fuentes de Hb en la orina: primero, se produce hemólisis intravascular, la Hb plasmática excede la capacidad de unión de la haptoglobina y la Hb libre se excreta en la orina. El otro es el sangrado del tracto urinario (especialmente del tracto urinario superior), donde los glóbulos rojos destruyen el escape de Hb cuando está hipertónico y/o hipotónico. En este momento, la reacción de sangre oculta del analizador de orina es positiva, pero no se ven glóbulos rojos o solo fragmentos de glóbulos rojos en la microscopía del sedimento de orina.
(2) Las moléculas de mioglobina (Mb) también contienen grupos hemo y tienen actividad peroxidasa. Mb existe principalmente en el músculo cardíaco y el tejido del músculo esquelético. El contenido en la orina humana normal es muy pequeño y no se puede detectar. Cuando se produce un daño grave al miocardio o al músculo esquelético, la Mb plasmática aumenta y se excreta por los riñones, lo que provoca un aumento en el contenido de Mb en la orina. Por lo tanto, la reacción en sangre oculta es positiva y el examen microscópico de los glóbulos rojos es negativo.
(3) La orina de algunos pacientes contiene enzimas termolábiles, que también pueden hacer que cambie el color del bloque de reactivo, lo que resulta en una reacción de sangre oculta positiva y un examen microscópico negativo.
(4) Ciertos contaminantes oxidativos, como el hipoclorito, pueden provocar reacciones falsas positivas en sangre oculta.
(5) Bacteriuria: la orina es un buen medio de cultivo para las bacterias. Durante la bacteriuria, algunas bacterias producirán sustancias oxidativas, lo que provocará que el color del bloque de reactivos cambie, lo que provocará una reacción de sangre oculta positiva y una microscopía de glóbulos rojos negativa. Además, la invasión de la peroxidasa microbiana también puede provocar falsos positivos.
(6) Los experimentos de almacenamiento a largo plazo y alta temperatura han demostrado que si la muestra no es fresca, el almacenamiento a largo plazo o el almacenamiento a alta temperatura, la tasa positiva de reacción de sangre oculta aumentará relativamente, mientras que la microscopía de glóbulos rojos disminuirá en consecuencia. y es probable que los resultados de la prueba sean falsos positivos. Por lo tanto, se recomienda que las muestras de orina no se almacenen durante más de 4 horas.
(7) El uso vencido o la contaminación de las tiras reactivas de orina, así como el almacenamiento inadecuado y los métodos de operación incorrectos pueden causar resultados falsos positivos.
(8) La sensibilidad del analizador de orina es demasiado alta (++ aparece en 0,2 mg/dl) y el rango de "diferencia de grado" es demasiado grande (+++ se encuentra en 0,8-50 mg/dl). A menudo se encuentra que la prueba del instrumento es ++, pero la prueba del espejo es ++. La prueba de glóbulos rojos fue negativa y no se pudo encontrar ninguna causa clínica de hemoglobinuria.
2. Falso negativo. Es decir, el examen microscópico es positivo y la reacción de sangre oculta del analizador de orina es negativa. Las razones más comunes son:
(1) Influencia de alimentos o medicamentos: cuando la orina se vuelve alcalina debido a la dieta o los medicamentos, los glóbulos rojos se disuelven y se rompen, formando partículas marrones. La reacción de sangre oculta es positiva, pero el examen microscópico es negativo.
(2) Cuando la VitC existe en grandes cantidades en la orina, puede competir por el oxígeno producido por la reacción, provocando reacciones falsas negativas.
(3) Las muestras de orina con una gravedad específica alta y un alto contenido de proteínas reducen la sensibilidad del reactivo que bloquea la reacción de sangre oculta, lo que provoca falsos negativos en la reacción de sangre oculta.
(4) El aumento del contenido de moco en la orina hace que los glóbulos rojos se envuelvan y el reactivo no pueda entrar en contacto con la Hb, lo que hace que la reacción de sangre oculta parezca falsamente negativa.
3. El impacto de la centrifugación en los resultados.
Si la velocidad de centrifugación es demasiado rápida, los componentes formados pueden destruirse, pero si la velocidad es demasiado lenta, cuando el número de glóbulos rojos por mililitro de orina es inferior a 5000, es posible que no se encuentren glóbulos rojos en el sedimento y se puede pasar por alto la glomerulonefritis latente. , por lo que cuando hay dudas sobre los resultados de la prueba, se puede utilizar la reacción de sangre oculta para confirmar.
El método del analizador de orina para detectar glóbulos rojos en la orina es extremadamente sensible y, en ocasiones, puede diferir de los resultados de la microscopía. Se deben considerar plenamente los factores que afectan los resultados de la medición y, en principio, se debe realizar un análisis completo junto con la práctica clínica. Los resultados positivos de la reacción de sangre oculta en los analizadores de orina deben determinarse mediante microscopía. El nuevo examen legal es un vínculo importante y clave para garantizar la calidad de las pruebas de orina. Si el resultado negativo determinado por el método del analizador de orina no coincide con el examen microscópico, también debe volver a examinarse para garantizar la precisión y confiabilidad de los resultados de la medición. Hasta ahora, los resultados de las pruebas de ningún instrumento pueden reemplazar completamente al microscopio. La microscopía del sedimento urinario sigue siendo un método de examen indispensable en el análisis de orina debido a su valor clínico único.