Le test de sang occulte dans l'urine est un élément essentiel des tests d'urine. Les méthodes de test couramment utilisées comprennent la réaction de sang occulte par analyseur d'urine et l'examen microscopique des globules rouges dans l'urine (examen microscopique des globules rouges).
Étant donné que la microscopie a une valeur clinique importante pour distinguer l'hématurie glomérulaire et non glomérulaire, certains chercheurs ont proposé que la microscopie soit la « référence » pour l'analyse des globules rouges dans l'urine et ne puisse pas être remplacée par un analyseur d'urine. Cependant, ces dernières années, avec la popularisation rapide des analyseurs d'urine, les paramètres de mesure se sont développés dans une direction rapide, simple et précise, offrant ainsi une meilleure base de diagnostic pour une utilisation clinique ; ne sont pas disposés à examiner les sédiments urinaires. Ainsi, dans certains hôpitaux, la microscopie urinaire a tendance à être progressivement remplacée par des analyseurs d’urine. À cette fin, YSENMED a testé des échantillons d'urine aléatoires provenant de 400 patients ambulatoires en utilisant deux méthodes : la réaction du sang occulte de l'analyseur d'urine et l'examen des globules rouges au microscope de l'urine, et a comparé le degré de concordance entre les deux méthodes.
1. Principe
L'analyseur d'urine utilise la méthode du papier de test chimique sec, qui détecte certaines substances chimiques dans l'urine en fonction du changement de couleur de chaque module sur la bandelette de test multi-liens après la réaction chimique avec les composants de l'urine, comme la détection directe du sang rouge. Les cellules et les globules blancs du sang induisent indirectement la présence ou l'absence de cellules. Le principe de la réaction sanguine occulte dans l'analyseur d'urine est le suivant : l'activité de type peroxydase de l'hème dans l'hémoglobine (Hb) peut décomposer le peroxyde pour libérer une nouvelle écologie [O], qui oxyde le substrat o-toluidine en o-toluidine. passe du jaune → vert herbe → bleu foncé. La microscopie urinaire utilise le grossissement du microscope pour présenter directement et intuitivement les cellules et autres composants tangibles sous le microscope, qui est un véritable reflet du substrat.
2. Méthode
(1) L'analyseur d'urine détecte le sang occulte urinaire. Trempez la bandelette de test d'urine dans 10 ml d'urine fraîche mélangée pendant 1 seconde, retirez-la, placez-la sur l'instrument pour la mesure et imprimez automatiquement les résultats.
(2) Microscopie : Prélever 10 ml d'urine dans un tube à essai, centrifuger à 1 500 tr/min pendant 5 min, jeter le surnageant et laisser 0,2 ml de sédiment. Après avoir soigneusement mélangé, retirez environ 20 μl sur une lame de verre, ajoutez une lamelle (2,0 cm × 2,0 cm), puis utilisez une lumière plus faible pour observer l'ensemble de l'image avec un objectif à faible grossissement afin d'éviter de manquer des objets petits mais significatifs. puis utilisez un microscope haute puissance pour identifier les cellules. Les résultats sont rapportés sous la forme : х/champ de puissance élevée (HP).
Étant donné que les principes des deux méthodes d'inspection sont différents et que les facteurs qui les affectent sont également différents, il existe certaines différences dans les résultats des deux méthodes d'inspection.
1. Faux positif. C'est-à-dire que la réaction du sang occulte de l'analyseur d'urine est positive et l'examen microscopique est négatif. Les raisons courantes sont :
(1) Hémoglobine (Hb) La réaction de sang occulte de l'analyseur d'urine peut avoir une réaction positive à la fois avec les globules rouges intacts et avec l'Hb libérée par dissolution des globules rouges, alors qu'un microscope ne peut détecter que les globules rouges non dissous dans l'urine. La teneur en Hb dans l'urine des personnes en bonne santé est très faible et qualitativement négative. Au cours de la maladie, il existe deux sources d'Hb dans l'urine : premièrement, une hémolyse intravasculaire se produit, l'Hb plasmatique dépasse la capacité de liaison de l'haptoglobine et l'Hb libre est excrétée dans l'urine. L'autre est le saignement des voies urinaires (en particulier des voies urinaires supérieures), où les globules rouges détruisent la fuite d'Hb lorsqu'ils sont hypertoniques ou/et hypotoniques. À ce stade, la réaction du sang occulte de l'analyseur d'urine est positive, mais aucun globule rouge ou seulement des fragments d'érythrocytes n'est observé dans la microscopie des sédiments urinaires.
(2) Les molécules de myoglobine (Mb) contiennent également des groupes hème et ont une activité peroxydase. Le Mb existe principalement dans le muscle cardiaque et le tissu musculaire squelettique. Le contenu de l'urine humaine normale est très faible et ne peut pas être détecté. Lorsque des lésions graves surviennent au myocarde ou au muscle squelettique, le Mb plasmatique augmente et est excrété par les reins, provoquant une augmentation de la teneur en Mb dans l'urine. Par conséquent, la réaction sanguine occulte est positive et l'examen microscopique des globules rouges est négatif.
(3) L'urine de certains patients contient des enzymes thermolabiles, qui peuvent également provoquer une modification de la couleur du bloc réactif, entraînant une réaction sanguine occulte positive et un examen microscopique négatif.
(4) Certains contaminants oxydants, tels que l'hypochlorite, peuvent provoquer des réactions sanguines occultes faussement positives.
(5) Bactériurie : l'urine est un bon milieu de culture pour les bactéries. Au cours de la bactériurie, certaines bactéries produiront des substances oxydantes, provoquant un changement de couleur du bloc réactif, entraînant une réaction sanguine occulte positive et une microscopie érythrocytaire négative. De plus, l’invasion de la peroxydase microbienne peut également provoquer des faux positifs.
(6) Des expériences de stockage à long terme et à haute température ont prouvé que si l'échantillon n'est pas frais, stocké à long terme ou stocké à haute température, le taux positif de réaction sanguine occulte augmentera relativement, tandis que la microscopie des globules rouges diminuera en conséquence, et les résultats des tests sont susceptibles d'être faussement positifs. Il est donc recommandé de ne pas conserver les échantillons d’urine plus de 4 heures.
(7) L'utilisation périmée ou la contamination des bandelettes de test d'urine ainsi qu'un stockage inapproprié et des méthodes de fonctionnement incorrectes peuvent entraîner des résultats de test faussement positifs.
(8) La sensibilité de l'analyseur d'urine est trop élevée (++ apparaît à 0,2 mg/dl) et la plage de « différence de grade » est trop large (+++ apparaît à 0,8-50 mg/dl). On constate souvent que le test de l'instrument est ++, mais le test du miroir est ++. Le test des globules rouges était négatif et aucune cause clinique d'hémoglobinurie n'a pu être trouvée.
2. Faux négatif. C'est-à-dire que l'examen microscopique est positif et la réaction sanguine occulte de l'analyseur d'urine est négative. Les raisons courantes sont :
(1) Influence des aliments ou des médicaments : lorsque l'urine devient alcaline en raison d'un régime alimentaire ou de médicaments, les globules rouges se dissolvent et se rompent, formant des particules brunes. La réaction du sang occulte est positive, mais l'examen microscopique est négatif.
(2) Lorsque la VitC existe en grande quantité dans l’urine, elle peut entrer en compétition pour l’oxygène produit par la réaction, provoquant ainsi des réactions faussement négatives.
(3) Les échantillons d'urine à densité élevée et riches en protéines réduisent la sensibilité du réactif bloquant la réaction de sang occulte, provoquant de faux négatifs dans la réaction de sang occulte.
(4) L'augmentation de la teneur en mucus dans l'urine provoque l'enveloppement des globules rouges et le réactif ne peut pas entrer en contact avec l'Hb, ce qui fait que la réaction du sang occulte apparaît faussement négative.
3. L'impact de la centrifugation sur les résultats.
Si la vitesse de centrifugation est trop rapide, les composants formés peuvent être détruits ; mais si la vitesse est trop lente, lorsque le taux de globules rouges par millilitre d'urine est inférieur à 5 000, les globules rouges peuvent ne pas être détectés dans les sédiments et une glomérulonéphrite latente peut passer inaperçue. , ainsi, en cas de doute sur les résultats du test, la réaction du sang occulte peut être utilisée pour confirmer.
La méthode d'analyse d'urine pour détecter les globules rouges dans l'urine est extrêmement sensible et peut parfois différer des résultats de la microscopie. Les facteurs affectant les résultats de mesure doivent être pleinement pris en compte et une analyse complète doit être effectuée en conjonction avec la pratique clinique. les résultats positifs d'une réaction sanguine occulte dans les analyseurs d'urine doivent être déterminés par microscopie. Un réexamen juridique est un maillon important et une clé pour garantir la qualité des analyses d'urine. Si le résultat négatif déterminé par la méthode d'analyse d'urine n'est pas cohérent avec l'examen microscopique, il doit également être réexaminé pour garantir l'exactitude et la fiabilité des résultats de mesure. Jusqu'à présent, les résultats des tests d'aucun instrument ne peuvent remplacer complètement le microscope. La microscopie des sédiments urinaires reste une méthode d'examen indispensable dans l'analyse d'urine en raison de sa valeur clinique unique.