L'immunotechnologie par luminescence est une méthode qui combine une réaction de luminescence avec une réaction immunitaire pour détecter des antigènes ou des anticorps. Il utilise une technologie de micro-multiplication avec une bonne sensibilité et spécificité ; il dispose d'une très large gamme de détection, allant des protéines traditionnelles, des hormones, des enzymes aux médicaments. Les instruments cliniques les plus largement utilisés sont les analyseurs d’immunoessai par chimiluminescence entièrement automatiques, les analyseurs d’immunoessai par chimiluminescence de microparticules entièrement automatiques et les analyseurs d’immunoessai par électrochimiluminescence entièrement automatiques.
Structure de base de l'analyseur d'immunoanalyse par luminescence
1. Composition d'un immunoanalyseur à chimiluminescence entièrement automatique
1) La partie hôte est la partie de mesure de réaction opérationnelle de l'instrument, y compris la configuration des matières premières, le chemin du liquide, la transmission mécanique, la détection du chemin optique et les pièces du circuit.
La partie équipement des matières premières comprend des coupelles de réaction, des plateaux d'échantillons, des plateaux de réactifs, de l'eau pure, du liquide de nettoyage et des dispositifs de stockage et de traitement des eaux usées sur la machine ; la partie chemin de liquide comprend des filtres, des bagues d'étanchéité, des pompes à vide, des tuyaux, des échantillons et des réactifs ; des sondes, etc. ; la partie de transmission mécanique comprend des capteurs, des rails de transport, etc. ; la partie de détection de chemin optique comprend des sources de lumière, des dispositifs spectroscopiques et des tubes photomultiplicateurs ; la partie de circuit comprend des systèmes de traitement d'alimentation et d'amplification et des cartes de commande de ligne.
2) Le système de traitement par micro-ordinateur est un élément clé de l'instrument et constitue le centre de commande et de contrôle.
Ses fonctions comprennent le fonctionnement contrôlé par programme, la surveillance automatique, l'indication et le jugement, le traitement des données, le diagnostic des pannes, etc., et est équipé d'un CD. L'hôte est également équipé d'une interface réservée, qui peut traiter automatiquement d'autres données via un stockage externe et fonctionner à distance, pour le développement étendu de l'automatisation des laboratoires.
2. Composition d'un immunoanalyseur de chimiluminescence de microparticules entièrement automatique
1) Le système de traitement des échantillons comprend la chambre de transfert et le système de sonde principal, chargé d'ajouter des échantillons, des réactifs et des tampons aux tubes de réaction.
2) Le système d'exploitation expérimental, c'est-à-dire le système fluidique, comprend un liquide de rinçage, un liquide résiduaire, une pompe et une vanne à substrat, une pompe à vide, un réservoir de stockage d'eau, un réservoir de liquide et une tour de rinçage de sonde.
3) Le système central d'alimentation et de contrôle se compose d'un support de tube à réaction, d'une cabine d'alimentation en tube de réaction, d'une zone à température constante et d'une cabine de lecture photoélectrique. Il est responsable du transport du tube de réaction et du chauffage du tube de réaction à une certaine température à travers la courroie à température constante pendant le processus de transfert. Lorsque le processus à température constante est terminé, le dispositif d'identification photoélectrique convertit le signal optique en signal électrique.
4) Le système de contrôle du micro-ordinateur se compose d'une carte de circuit imprimé, d'une alimentation, d'un lecteur de disque dur, d'un lecteur de disquettes, d'un bouton de redémarrage et d'un interrupteur de verrouillage interne. L'équipement périphérique comprend des moniteurs couleur, des imprimantes, des claviers, des stylos de reconnaissance de codes-barres externes, des lecteurs de codes-barres externes et des bras de connexion. L'instrument peut effectuer les opérations de commande correspondantes ainsi que la lecture et l'archivage des données.
3. Composition d'un immunoanalyseur à électrochimiluminescence entièrement automatique
Il est principalement composé d'un plateau d'échantillons, d'un kit de réactifs, d'un plateau de réaction d'incubation, d'un système de détection électrochimique et d'un système de contrôle informatique, et peut être divisé en trois modules unitaires.
1) L'unité de contrôle est un ordinateur complet, équipé d'un support et d'un système d'impression.
2) L'unité centrale est principalement composée d'un lecteur de codes-barres, d'un compartiment à échantillons, d'un plateau tournant pour support d'échantillons, d'un rail de module, etc.
3) Le module d'analyse est le cœur du système de détection et comprend principalement la zone de pré-nettoyage, la zone de mesure, la zone de réactifs du système, la zone de réactifs et la zone de consommables.
Comment fonctionne l'analyseur d'immunoanalyse par luminescence ?
La technologie de dosage immunologique par chimiluminescence, également connue sous le nom de technologie de micromultiplication, comprend deux méthodes :
Méthode de compétition : principalement utilisée pour déterminer les substances antigéniques à petites molécules. Utilisez une quantité excessive d'anticorps recouverts de particules magnétiques, ajoutez en même temps l'antigène à tester et l'antigène de l'ester d'acridinium marqué quantitativement dans la coupelle de réaction et incubez-le, de sorte que l'antigène et l'anticorps marqués (ou l'antigène à tester et l’anticorps) se combinent pour former un complexe.
Méthode sandwich : principalement utilisée pour déterminer les substances antigéniques macromoléculaires. L'anticorps marqué et l'antigène de test se combinent simultanément avec l'anticorps d'enrobage pour générer un complexe d'anticorps luminescent anticorps d'enrobage-antigène de détection. L'instrument utilise certains groupes chimiques pour marquer l'antigène ou l'anticorps. Les groupes chimiques sont oxydés pour former un état excité. Lors du retour à l'état fondamental, des photons d'une certaine longueur d'onde sont libérés. en énergie électrique, reflète la mesure de la lumière sous forme numérique, puis calcule la concentration de la substance mesurée.
Immunoanalyseur par chimiluminescence de microparticules entièrement automatique
En appliquant les principes immunologiques classiques, des réactifs d'anticorps monoclonaux sont utilisés, des particules magnétiques sont utilisées comme supports en phase solide, la phosphatase alcaline est utilisée comme substance standard et le 3-(2'-spiral adamantane)-4-méthoxy-4 est utilisé comme substance luminescente. agent -(3"-Phosphoryloxy)phényl-1,2-dioxétane (AMPPD), les petites substances moléculaires sont mesurées en utilisant la méthode de compétition ou la méthode de capture d'anticorps, tandis que les grandes substances moléculaires sont mesurées en utilisant la méthode sandwich.
Immunoanalyseur à électrochimiluminescence entièrement automatique
L'échantillon à tester est mélangé avec les particules paramagnétiques recouvertes de l'anticorps et l'anticorps marqué avec l'agent luminescent et incubé ensemble dans une coupelle de réaction pour former un complexe d'anticorps positif recouvert de microbilles-antigène-agent luminescent. Lorsque les particules magnétiques traversent la surface de l'électrode, elles sont attirées par l'aimant installé sous l'électrode et l'anticorps libre marqué par l'agent luminescent est éliminé par le tampon. En même temps, une tension est appliquée à l'électrode, ce qui amène le marqueur luminescent ruthénium terpyridine [Ru(bpy)3]2+ à transférer des électrons sur la surface de l'électrode pour produire une luminescence électrochimique. L'intensité de la lumière est proportionnelle à la concentration. de l’antigène à mesurer. Le test immunologique de suppression est utilisé pour la détection d'antigènes protéiques de petit poids moléculaire ; le test immunologique en sandwich est utilisé pour la détection de substances de grand poids moléculaire.
Caractéristiques de l'analyseur d'immunoessai par luminescence
Utilisant une combinaison de technologie de chimiluminescence et de technologie de séparation de particules magnétiques, il s’agit d’un système d’analyse intelligent entièrement automatique, à accès aléatoire et contrôlé par logiciel. Dans le système réactionnel, des particules magnétiques sont utilisées comme supports en phase solide. Son diamètre n'est que de 1,0 um, ce qui augmente considérablement la surface du revêtement, augmente la quantité d'adsorption d'antigène ou d'anticorps, accélère la réaction et facilite le nettoyage et la séparation. Il présente les avantages d'un fonctionnement flexible, de résultats précis et fiables, d'une longue durée de stockage des réactifs et d'un degré élevé d'automatisation.
Immunoanalyseur par chimiluminescence de microparticules entièrement automatique
La technologie de chimiluminescence des microparticules est utilisée pour mesurer quantitativement les composants traces et les concentrations de médicaments dans le corps humain, qui présente les caractéristiques d'une spécificité, d'une sensibilité et d'une stabilité élevées.
Immunoanalyseur à électrochimiluminescence entièrement automatique
Le test immunologique par électrochimiluminescence est une réaction de chimioluminescence spécifique déclenchée par l'électrochimie à la surface de l'électrode. Il appartient à la troisième génération de technologie de test immunologique par chimiluminescence. Par rapport à d'autres technologies immunologiques, elle présente des avantages très évidents : le marqueur utilisé étant la terpyridine de ruthénium, qui peut être associée à divers composés tels que des protéines, des hormones haptènes, des acides nucléiques, etc., les éléments de détection sont très larges car magnétiques ; les microbilles sont recouvertes de "Streptomyces". La nouvelle technologie de revêtement en phase solide "avidine-biotine" permet une sensibilité de détection plus élevée, une plage linéaire plus large et un temps de réaction plus court.
Maintenance de l'analyseur d'immunoessai par luminescence
Les équipements avancés nécessitent un entretien adéquat. La maintenance quotidienne, la maintenance hebdomadaire et les tests réguliers du système sont les conditions préalables pour garantir le fonctionnement normal de l'instrument. La maintenance de l'immunoanalyseur à chimiluminescence entièrement automatique comprend les aspects suivants.
1. Entretien quotidien : gardez le boîtier de la machine propre chaque jour pour empêcher la poussière de pénétrer dans l'instrument. Avant d'effectuer la maintenance de routine quotidienne, assurez-vous de vérifier si l'état de la température du système, les pièces du circuit de liquide, les pièces consommables, les réservoirs de liquides résiduaires, les tampons, etc. répondent tous aux exigences, puis nettoyez le système conformément aux procédures de maintenance et effectuez les opérations de maintenance. .
2. Entretien hebdomadaire : Vérifiez le rail de guidage supérieur de la sonde principale. Après l'inspection, nettoyez le rail de guidage inférieur de la sonde principale avec un coton-tige sans fibres. Entrez ensuite dans le programme d'entretien sous le menu principal comme requis pour un nettoyage spécial. Après le nettoyage, nettoyez la sonde principale avec un tampon d'éthanol. Sondez la partie supérieure et vérifiez le filtre du réservoir à déchets. Vérifiez les points de détection sur la bande d'incubation pour détecter la poussière et essuyez-les avec un coton-tige sans fibres. Les tests du système doivent être effectués après la maintenance hebdomadaire pour garantir que les données des tests du système se situent dans la plage de contrôle.
3. Entretien mensuel : utilisez une brosse spéciale en acier inoxydable pour frotter l'intérieur de la sonde principale, de l'aiguille d'échantillonnage d'échantillon et de l'aiguille de réactif une fois par mois afin d'éliminer la saleté. Étant donné que l'espace à l'intérieur de l'aiguille est petit, après avoir frotté, utilisez une seringue pour absorber le sérum physiologique et rincez l'intérieur de l'aiguille à plusieurs reprises pour éliminer toute la saleté. L'extérieur de l'aiguille peut être nettoyé avec de l'alcool [1].
Dépannage courant de l'immunoanalyseur à luminescence
Les analyseurs de dosage immunologique par chimiluminescence ont un degré élevé d'automatisation et disposent de fonctions d'autodiagnostic. Lorsqu'un défaut survient, l'instrument peut généralement le détecter automatiquement, afficher un message d'erreur et déclencher une alarme.
Les défauts courants incluent principalement les aspects suivants.
1. Le manomètre indique zéro : effectuez un test de pression sous vide et vous pouvez entendre le bruit de fonctionnement de la pompe, mais le manomètre indique zéro. Tout d'abord, vérifiez le tube à vide connecté à la bouteille de liquide usé, testez la pression du vide et déterminez si le défaut est causé par une fuite d'air ou des dommages au manomètre. Vérifiez les interfaces de chaque canalisation pour détecter toute fuite d'air, vérifiez les quatre électrovannes concernées (lors du test de pression sous vide, ces quatre électrovannes ne fonctionnent pas et sont dans un état fermé) et réparez ou remplacez les canalisations ou électrovannes problématiques en temps opportun. manière.
2. Pression de vide insuffisante : effectuez un test de pression de vide. Si le résultat du test est normal, on peut voir que le capteur de vide ne peut pas détecter la pression de vide. Le test de pression de cette machine se compose de deux capteurs détectant respectivement une haute et une basse pression. Après avoir réglé ou nettoyé le capteur problématique, testez à nouveau la pression du vide. Une fois que la pression est normale, ajustez les vis du capteur de manière à ce que les indications de haute et de basse pression soient. dans la plage spécifiée.
3. Erreur du corps lumineux : Vérifiez la surface du corps lumineux et constatez qu'il y a une fuite de liquide. Ce défaut peut être vérifié en trois étapes : Vérifiez si la sonde de liquide résiduaire, les canalisations associées et les piscines de nettoyage sont bloquées ou fuient. vanne pour ajouter des échantillons et drainer le liquide. La saleté dans l'électrovanne entraînera un mauvais débit ou drainage de l'eau. Vérifiez s'il y a une fuite d'air dans la canalisation de nettoyage de la pompe alcaline connectée à la canalisation de la sonde de liquide usé et s'il y a des fissures dans la pompe alcaline.
4. Erreur de piste : Ce défaut est causé par la dislocation du support d'échantillons dans la piste, ce qui rend la piste incapable de fonctionner. Puisque la piste est très longue et scellée, il est généralement difficile de la démonter. connecté à la piste en premier. Si cela est normal, vérifiez la piste. Retirez le porte-échantillon égaré et le défaut peut être éliminé.
